Em Assassin's Creed: Brotherhood, vimos Ezio Auditore da Fireze ir ao coração da Itália em busca de vingança contra a família Borgia. No entanto, mesmo após ter acabado com seus inimigos, o assassino continua tendo vários inimigos a enfrentar.
No DLC The Da Vinci Disappearance, somos levados ao ano que antecede a ida do protagonista à Espanha para acabar com Cesare Borgia. Em seu retorno a Roma, seu amigo Leonardo Da Vinci é sequestrado por uma seita ocultista que pretende utilizar um conhecimento antigo para dominar o mundo. A partir disso, é preciso recuperar obras de artes famosas para saber onde o artista é feito refém.
Além das oito novas missões, o conteúdo adicional traz quatro personagens inéditos ao modo multiplayer e dois modos exclusivos. Em Escort, por exemplo, duas equipes lutam para matar e proteger os jogadores mais importantes da partida enquanto o Assassinate funciona como um Deathmatch em que todos os usuários são alvo e caçadores ao mesmo tempo.
